宫颈癌患者宫颈脱落细胞 HPV、病变组织 Brn-3a的表达变化及意义

伊心浩,郑 妮,王际亮

(胜利油田中心医院,山东东营 252700)

研究证实,约 99.8%的宫颈癌合并人乳头状瘤病毒(HPV)感染[1],HPV是宫颈癌的主要致病因子。HPV致癌的分子机制复杂,可能与多种因子的表达有关。Brn-3a是 POU转录因子家族的一员,在成人周围神经系统和中枢神经系统特异区域高表达,其表达代表了中枢神经系统最早的有丝分裂后神经元形成[2]。研究发现,Brn-3a在非神经来源的细胞类型,包括 B和 T淋巴细胞以及乳腺、宫颈和睾丸细胞中都有表达[3]。2006年 10月 ～2008年 6月,我们检测了 19例宫颈癌患者宫颈脱落细胞中HPV及病变组织中 Brn-3a的表达变化,并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 104例宫颈病变患者,年龄 21～54岁,平均 34.8岁。其中宫颈炎症 30例,宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)20例,CINⅡ级 16例,CINⅢ级 19例,宫颈癌 19例。患者均未接受任何妇科相关疾病的治疗。

1.2 方法

1.2.1 HPV检测方法 采用导流杂交方法。均用宫颈刷刷取患者宫颈细胞,分离提取 DNA后按照扩增反应体系的要求进行 PCR扩增,然后行 PCR产物杂交,最后显色判断结果。检测结果阳性点为清晰可见的蓝紫色原点,根据膜条 HPV分型分布图判断阳性点。

1.2.2 Brn-3a检测方法 采用免疫组化 SP法。取患者宫颈病变组织,常规制作石蜡标本并切片,按试剂盒说明书操作。细胞显示棕色或有棕色颗粒者为阳性细胞。随机观察 5个高倍视野,每个视野计数100个细胞,计算阳性细胞数的平均百分比。0～5%为 0分,～25%为 1分,～50%为 2分,～75%为3分,＞75%为 4分；染色强度:未染色为 0分,淡黄色为 1分,棕黄色为 2分,棕褐色为 3分；两者相加所得总分 ＞1分为阳性。

1.2.3 统计学方法 采用CS2000统计软件。计数资料采用 χ2检验,相关关系采用配对资料的关联性分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级和宫颈癌患者宫颈脱落细胞中 HPV阳性率分别为 43.3%、50.0%、68.8%、84.2%、94.7%,宫颈组织中 Brn-3a阳性率分别为 6.7%、15.0%、62.5%、78.9%、89.5%。CINⅡ ～Ⅲ级及宫颈癌患者 HPV、Brn-3a阳性率均明显高于宫颈炎和 CINⅠ患者(P均 ＜0.01)。宫颈癌患者宫颈脱落细胞中 HPV及病变组织中 Brn-3a的表达呈正相关(r=0.283,P＜0.01)。

3 讨论

研究表明,HPV感染在宫颈肿瘤发生发展中起重要作用[4,5]。近年来,随着检测技术的迅速发展,HPV在宫颈癌筛查及其癌前病变预测中发挥了重要作用,但也存在一些局限性。虽然文献报道,HPV感染使宫颈癌的相对危险性增加 250倍[6],但病毒的短暂感染并不引发恶性病变的发生,长期持续感染才能导致宫颈癌的发生。因此,积极地治疗宫颈高危型 HPV感染,对阻断病程、预防宫颈癌,特别是宫颈浸润癌的发生具有重要意义。

既往,对 Brn-3a的研究主要集中于神经系统,包括对其表达的调节及其作用机制等。Ndisang等[5]认为,在人类宫颈细胞中,Brn-3a有激活编码HPV E6和 E7蛋白基因转录的作用,在 CINⅢ患者的宫颈活检组织中 Brn-3a表达水平增高。因此,Brn-3a可作为 HPV致癌基因转录活化的生物标志物[6,7],其在宫颈转化过程中发挥着关键性作用。本研究发现,CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌患者宫颈脱落细胞中 HPV与病变组织中 Brn-3a阳性率较高,且二者的表达呈正相关。提示 Brn-3a与 HPV的致癌作用密切相关,联合检测对于病情的判断具有很好的指导意义。

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