美国大学的动物实验的准入制管理

汪思应

(安徽(省)医科大学实验动物中心，安徽 合肥 230032)

美国大学的动物实验的准入制管理

汪思应

(安徽(省)医科大学实验动物中心，安徽 合肥 230032)

在美国，动物实验管理早就进入法制化轨道。任何大学、科研院所等部门进行动物实验都必须遵守美国实验动物一系列法规和规定。比如经美国国会授权，农业部(USDA)首先制定的《动物福利法》(Animal Welfare Act)、随后卫生部(PHS)制定的“检验、研究和教学中饲养管理和使用脊椎动物的法规”(US Government Principles for the Utilization and Care of Vertebrate Animals Used in Testing，Research and Training)及“人道使用和饲养管理实验动物的法规”(Public Health Service Policy on Humane Care and Use of Laboratory Animals)。尤其政府部门如NIH、FDA、CDC及DoD等资助或批准的科学研究、药物研发等课题中的动物实验，除遵守上述法规外，还必须符合这些部门颁布的一些规范如FDA的GLP规范(Good Laboratory Practice)及NIH“实验动物饲养管理和使用指南”(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)等。上述法律法规的监督主管部门还针对法规编写了相应工作指导手册指导各级管理机构进行具体的实验动物管理。在这些管理机构中，最基层、与科研人员关系最密切的就是各单位如大学、研究所等根据联邦法规必须成立的实验动物管理委员会(Institutional Animal Care and Use Committee，IACUC)(有些小的单位可以利用其上级单位的IACUC)。所以对于一所大学的科研人员，动物实验准入的全部具体工作由IACUC管理。

IACUC一般由分管科研的副校长负责，3～5人组成，隶属学校，但根据联邦法规开展工作。其最基本的功能就是确定本单位所有动物实验都按照联邦法律、条例和规则来进行。主要工作包括:(1)接受审核并批准PI动物实验申请(Animal protocol)及年审(renewal);(2)制定动物试验中各种 SOP、指南及规程;(3)强制执行对操作人员进行动物实验前各种培训并发证;(4)讨论并审核本单位研究人员进行动物实验时遇到的各种法规中不明确的特殊情况并对本单位动物实验指南等进行修订;(5)检查本单位动物设施及动物实验规范管理情况，接受本单位一切违反动物实验规程的举报并处罚等，有时也对本校研究人员(主要是PI)申报课题时标书中动物实验部分进行合理性规范性预审。所以，要在美国大学进行动物实验，PI必须熟悉三个人:第一是IACUC主任或执行秘书获得对课题及animal protocol有用信息;第二是单位或动物中心兽医师为你提供技术帮助;第三是动物中心主任，在你获得批准后为你安排实验时间和空间等。

笔者相继在美国 CaseWesternReserve University(CWRU，私立)及 University of Kentucky(UK，公立)大学进行过小鼠动物实验，根据本人经历及与美国IACUC人员探讨后认为:要在美国进行动物实验，首先是 PI有经费且其 animal protocol获准通过，随后就是实验人员进行一系列培训并获得通过，最后才能进入相应的动物室进行动物实验。本文就PI的animal protocol及强制培训等部分内容做简单介绍，仅供国内同行参考并欢迎批评指正。

1 PI的Animal Protocol

Animal Protocol表格可以由学校实验动物室网页上获得，填好后网上递交，时限根据研究课题一般为2～3年，但每年必须 renewal。主要内容包括:(1)Protocol Title:即动物实验名称，必须与本单位已经存在的名称不同，防止重复实验(renewal的除外);(2)PI Contact Record:PI的信息，除了联系信息外，还要提供 PI有多长时间的动物实验经历;(3)Funding:经费来源情况包括你在学校的账号;(4)Synopsis:研究摘要，要求简明扼要的写出研究目标、主要研究内容及研究意义，要求科普化，因为任何IACUC成员中必有一名外行人员，必须让他们看懂。不允许将研究标书中的摘要复制过来。要强调你将在动物身上做些什么，怎样有效人道地使用动物及保证其福利。(5)Background:研究背景，主要是简短介绍本研究的必要性和研究假设(Hypothesis)形成的主要论据。Renewal的 protocol还必须包括已经取得进展。(6)Literature Search:这部分相当于查新，要求至少检测2个数据库并在一定范围内进行调查，提供出三个方面的信息即本研究是否是不必要的重复;是否可以用其他研究方法替代动物实验;能否有方法让实验动物免受或少受痛苦。(7)Experimental Design:实验设计，主要介绍课题标书中动物实验设计部分，包括怎样的步骤及何时来处理动物，对动物怎样操作。不要叙述研究目的及实验动物的数量。文字多少依赖于实验的复杂程度。(8)Hazardous Agents:生物危害物，主要阐明动物实验中试剂等是否对人或动物产生危害，如有无放射性物质、有无重组核酸类物质、有无人类及动植物病原体、有无急性毒物或化学致癌物及其他有害物。如果有需要分别填写相应的等级表。(9)Species Usage:动物种类的使用，这部分要求填写的内容很多，包括选哪种脊椎动物;动物是否通过公共区域运输及其运输方式;是否在临床区使用动物及其组织器官等;种类选择及使用动物数的依据;动物实验室具体地点及是否对动物进行手术;活体动物是否带离动物实验室12或24 h，如果是，说明理由及措施;对动物有害的试剂或药物包括麻醉剂的用量等详细信息(每种药物包括麻醉剂或试剂均需分别填写);动物实验过程中可能遭受的痛苦及解决方案;动物的安乐死等。(10)Personnel Information:实验人员信息，包括 PI在内的动物实验人员详细信息，其中要说明已有的动物实验经历及本次实验中任务等。一份Animal Protocol提交后，经过IACUC的审核，到通过约需1～3个月时间。如果动物实验人员违反操作规程被发现或被人举报(网上设有匿名举报免费电话)被证实，将被取消实验动物资格或赶出大学，PI的Animal Protocol将被取消。重新申请的审核时间是6～12个月。

2 网络化的动物实验培训

当一名研究人员如博士后进入一所大学或其他研究机构，办完必须的手续获得 ID后，第一件事就是进行生物安全培训，获得通过后，才能进入实验室进行实验，需要进行动物实验的，就必须通过强制性的网上实验动物培训和考核(这时你的电子钥匙即key将自动激活，能够进入动物实验室大门)，最后进入动物房实地培训。获得动物实验室人员认可即可以进行动物实验。如果涉及动物辐照或特殊危害性处理还需要放射生物学等培训。

动物培训一般分为两种，一种是仅在本单位培训(CWRU采用)，即本单位动物实验室网页上展示的PPT形式的培训内容，详细介绍了动物实验中应该遵循的法规、各种规范和安全条例等，同一单位不同的动物实验室要求不同，基本包括基础训练(如CWRU的 Wolstein Research Building动物实验的 Wolstein Orientation)，和啮齿类的 microisolator technique、大动物手术、GLP实验室的 GLP、P3实验室的ABSL3等特殊的部分，最后网上考核，考核通过后，相应动物中心负责人会通知你去动物中心进行现场培训。现场培训主要是介绍动物实验室的结构，各种安全条例，常规操作包括一般动物操作等。第二种要求更严格(UK采用)，除本单位培训外，还委托美国实验动物科学协会即 AALAS(American Association of Laboratory Animal Science，为民间组织，提供资质认证和培训，美国官方承认)来培训。一般由你本人或系秘书首先向本单位IACUC申请培训，单位 IACUC会在 AALAS为你申请一个账户(AALAS Learning Library Account)首先进行网上培训并考核，AALAS网上培训课程(Animal Care and Use Courses Library)有很多，UK要求的内容由两部分即Euthanasia of Research Animals-AVMAGuidelines及 Workingwiththe IACUC-non VA version，通过考核(每部分20～25个选择题，80分及格)后，获得2个证书及积分。随后在本单位进行 Occupational Health Training考核及填表完成Animal Worker Questionnaire。再等待通知进入动物室进行现场培训获得动物实验资格。

进行动物实验时必须严格按照规则和你自己的Animal protocol进行。不得随意更改如实验设计，动物处理方式、剂量、时间等。也不得将活的动物带离动物实验室在自己实验室放置超过24 h。一切违法规则的事均可能被匿名举报，IACUC设有举报信箱。查实后即可能被取消动物实验资格或实验室工作资格。Animal protocol也有可能被取消，重新申请需6个月以上的时间。所以，一般美国的PI不轻易进行动物实验室。不仅价格昂贵，手续复杂，还有被吊销资格的风险。这些都是IACUC的工作范畴。

我国的实验室生物安全包括动物实验安全日益受到重视，我国各研究单位也设有类似于美国IACUC的动物试验管理机构，但多数尤其是落后地区没有很好地开展实质性的工作，这于我们的经济发展水平相关，还可能于我国有关实验动物的法规不成熟，没有具体细则、可操作性不强等诸多因素有关。这依赖于广大实验动物领域的专家们的进一步努力。

致谢:感谢UK的 Xianglin Shi及 Jia Luo教授慷慨提供其 Animal protocol。感谢 UCLA Transgenic Facility主任Meisheng Jiang教授关于美国实验动物的介绍和讨论，感谢CWRU Chengkui Qu教授的指点。

2010-02-24