紫外分光光度法快速测定面粉制品中过氧化苯甲酰(BPO)的含量*

王晓鹏 刘 欣

(泰山医学院化学与化学工程学院，山东 泰安 271016)

过氧化苯甲酰(BPO)常被用作面粉的改良剂、增白剂，如果过量使用，则会产生对人体有害的苯甲酸和苯酚等物质。不仅会破坏面粉中的维生素A、E等营养成分，而且会失去面粉特有的麦香味。过量食用增白剂对人体的危害主要体现以下三方面：一是破坏面粉中的维生素。二是损害机体的重要脏器而诱发癌症。三是影响钙质的吸收。 长期食用增白剂含量超出国家标准的面粉及面制品，会加重肝脏的负担，造成苯慢性中毒，出现恶心、呕吐，引起头昏、乏力、神经衰弱，对肝功能衰退的人来说，更容易引发多种疾病。因此，美国、日本、欧盟等发达国家已禁止其在小麦粉中使用。

GB2760《食品添加剂使用卫生标准》中规定我国小麦粉中BPO的最大使用量为0. 06 g/kg，检验方法是GB/T18415-2001《小麦粉中过氧化苯甲酰的测定方法》，标准采用气相色谱法。由于检测仪器昂贵，测量时间长，操作繁琐，不利于基层及偏远地区生产企业和执法单位对BPO的监测。因此，寻找一个快速简便而有效地测定方法显得十分重要。本文采用紫外分光光度法测定面粉制品中过氧化苯甲酰含量,方法操作简便,容易推广。[2]

1 试验部分

1.1 原理

过氧化苯甲酰可以被无水乙醇提取出,在酸性加热的条件下能把Fe2 + 氧化成Fe3 + ,Fe3 +与邻菲罗啉发生褪色反应,褪色反应与过氧化苯甲酰含量在一定范围内呈线性关系。[31]

1.2 主要仪器与试剂

TU - 1810 PC紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器责任有限公司) , FC 204电子分析天平, TDL - 60B离心机, 1040 /H超声振荡器(日本日立公司)，恒温水浴锅，比色管。

1.0mg/ml的过氧化苯甲酰标准溶液:准确称取0.1000g过氧化苯甲酰纯品, 用无水乙醇溶解, 于100ml容量瓶中定容至刻度。

0.1mg/ml的过氧化苯甲酰标准溶液:准确吸取上述标液10ml,用无水乙醇将其稀释至100ml 容量瓶中。0.001mol/L 的硫酸亚铁铵溶液: 准确称取0.0392g硫酸亚铁铵固体, 用蒸馏水溶解, 定容至100ml。

0.003mol/L的邻菲罗啉溶液:准确称取0.0595g邻菲罗啉固体,用蒸馏水溶解,定容至100ml。

乙酸-乙酸钠缓冲液:取无水乙酸钠8.3g溶于水中,加冰乙酸6ml,稀释至100ml,用酸度计调其pH,使pH=5。

1.3 试验方法

1.3.1标准曲线的绘制

准确吸取0.1mg/ml 的过氧化苯甲酰标准液0.00ml、0.08ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml于25 ml比色管中,再准确吸取1.0mg/ml的过氧化苯甲酰标准液0.20ml、0.40ml、0.60ml 于另外3个比色管中, 向9 个比色管中分别依次加入0.001mol/L硫酸亚铁铵溶液1.0ml、乙酸- 乙酸钠缓冲液2.5ml,混匀后置于水浴60℃中反应5min,取出冷却至室温后, 加入0.003mol/L 的邻非罗啉溶液1.0ml,用蒸馏水定容至刻度,混匀后静置20min,用1cm比色皿测定其吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

1.3.2样品处理

准确称取0. 5000 g面粉样品,准确加入10ml无水乙醇,超声提取5min,放置10 min,然后以4000 r/min离心5min取离心液。按标准曲线的步骤,测定其吸光度,然后在标准曲线范围内计算面粉中过氧化苯甲酰的含量。[4]

2 结果与讨论

2.1 吸收波长选择

取1.0mg/ml的过氧化苯甲酰标准溶液0.4ml于25ml比色管中,另一只不加过氧化苯甲酰标准溶液做参比,然后按标准曲线绘制的方法测定其吸光度值。结果如表1:

由此我们可以看出波长在510nm处,吸光度值最大,所以我们选择510nm。

表1 波长选择

2.2 PH值的选择

分别配制PH值为2.6、3.0、3.8、4.2、4.5、5.0、5.4、5.8的乙酸-乙酸钠缓冲液，根据试验条件得到以上pH值下的吸光度值，发现在pH=4.5时吸光度最大。

2.3 温度选择

取1.0mg/ml的过氧化苯甲酰标准溶液0.4ml于25ml比色管中，在不同温度下测量吸光度值。试验结果表明，在60℃时线性最好，所以试验选择60℃水浴加热。

2.4 反应时间的选择

取1.0mg/ml的过氧化苯甲酰标准溶液0.4ml于25ml比色管中，按照试验条件分别选择反应时间为2 min 、5min、10 min、20 min、30 min和60 min测定吸光度值，结果如表2。

2.5 线性范围

准确吸取过氧化苯甲酰系列标准溶液，按试验方法测定吸光度，BPO含量在浓度0.00～0.80 mg/ml范围内符合朗伯- 比尔定律，摩尔吸光系数为1.1 × 104L/mol·cm。求得线性回归方程为A= 0. 1404 +0.6888C(mg/ml)(n=7)，相关系数为0.9961。10 次空白实验结果的标准偏差(s=0.013)求得检出限为0.096 mg/kg。

表2 反应时间选择

由此选定反应时间为5min。

3 样品分析

按照1.3.2中方法对从农贸市场随机购买的3种面粉进行BPO测定，在510nm处测定吸光度值，平行测定6次，测定结果见表3，加标回收率试验见表4。[6]

表3 样品测定结果

表4 加标回收试验

本法可直接测定BPO含量，方法反应机理简单，实验操作简便、快捷、成本低，适用于基层单位测定小麦粉中微量的BPO。由于BPO是一种典型的过氧化物，长时间放置受热、光照或辐射等，导致部分BPO分子中的过氧链断裂，分解生成O2和苯甲酸，使测定结果偏低，所以本法适用于新出厂的面粉测定。

[1] Standard of the chemical industry (化学工业标准) 1Beijing (北京) : Chinese standard press中国标准出版社, 1996.1463 - 476.

[2] 周绍芸.分光光度法快速测定面粉中过氧化苯甲酰[J].质量检验与检测,2007,6:58-59.

[3] 裴翠锦,姚国光. 紫外分光光度法测定面粉中的过氧化苯甲酰[J].计量与测试技术,2008,35:46-49

[4] 丁静,陈小全,任少红. 面粉中过氧化苯甲酰和苯甲酸同时测定的导数—比导数紫外分光光度法[J].职业与健康,2008,5:841-843.

[5] 邓真丽,王龑龙,李栋,等. 二阶导数紫外分光光度法测定面粉中的过氧化苯甲酰[J].化学分析计量,2005,14:34-35.

[6] 张东, 余萍, 高俊杰.光度法测定小麦面粉中过氧化苯甲酰[J].理化检验-化学分册,2008,5:36-437.