海带多糖排铅作用研究*

王园园 于 一 倪倍倍 王蜀平 石振艳 岳旺

(青岛大学医学院药理学教研室，山东 青岛 266021)

铅污染威胁人类健康，其源于含铅食品、油漆类物品、含铅化妆品、染发剂、汽车尾气等。铅类化合物是一种很难降解，沉积于机体，可对骨髓造血系统、心血管系统、免疫系统、神经系统等产生毒害作用[1-2]。现临床药物依地酸钠钙、二巯基丁二酸钠等络合剂可治疗铅中毒，其排铅效果虽好，但有过敏等毒副作用。因此，寻找一种天然、低毒的排铅药物已备受关注[3]。

海带多糖是从海藻中提取的水溶性酸性多糖。已有报道称海带多糖可提供氨基、醛基以及硫酸根等，与金属离子有较强的螯合作用[4-5]。本研究建立大鼠铅中毒模型，采用原子吸收分光光度法、比色法等方法，研究海带多糖的排铅作用。

1 材料与方法

1.1 动 物

Wistar大鼠，雌雄各半，160-180 g，由河北医科大学实验动物中心提供(动物合格证号：SCXK(鄂)2004-0007)

1.2 仪 器

分光光度计(723N);原子吸收分光光度计(日本日立Z-7000型)、电子天平、显微镜、酶标仪(MD29SpectraMax 190)

1.3 药品与试剂

海带多糖，购自青岛明月海藻集团有限公司(批号：080318)；青霉胺片，上海信谊万象药业股份有限公司生产(批号：080102)；肝素钠注射液，天津市生物化学制药厂生产(批号：20070601)；醋酸铅等均为国产分析纯。标志酶测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.4 实验方法

1.4.1实验动物分组方案

大鼠按体重随机分为6组，每组8只，雌雄各半，随机分正常对照组(正常饮食30 d)、模型组(自由饮用0.3%醋酸铅水溶液30 d)、阳性对照组(自由饮用0.3%醋酸铅水溶液30 d +按90 mg·kg-1体重ip青霉胺21 d)、海带多糖低、中、高剂量组(自由饮用0.3%醋酸铅水溶液30d +50 mg·kg-1、100 mg·kg-1、200 mg·kg-1ig海带多糖)。

1.4.2血铅及血清中有关酶的测定

实验一个月后，各组动物麻醉，从腹主动脉取血。取全血，采用高铁血红蛋白还原法，测定G-6-PD活力，并在推片煌焦油蓝染色光镜下计数1000个红细胞中网织红细胞 (Retic)数；取血清，采用原子吸收分光光度计测定血铅，采用分光光度法、比色法测定血清中LDH、ACP、β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)等相关酶活性。

1.5 统计学处理

数据采用单因素方差分析，用spss13.0统计软件进行统计处理。

2 结 果

2.1 海带多糖对大鼠血铅的影响

与空白对照组比较，各组血铅均升高，尤其是模型对照组，说明铅中毒模型造模成功(P<0.05)；与模型对照组比较，阳性药物组和海带多糖高剂量组缓解血铅升高水平(P<0.05),说明海带多糖能够降低铅中毒大鼠体内的血铅含量，并呈现量效关系。

表1 海带多糖对大鼠血铅的影响

注：与空白对照组比较，aP<0.05；与模型对照组比较，bP<0.05

2.2 海带多糖对大鼠血中网织红细胞的影响

与空白对照组比较，模型对照组网织红细胞数目升高，说明铅中毒模型造模成功(P<0.05)；与模型对照组比较，海带多糖高、中剂量组降低网织红细胞数目(P<0.05),说明海带多糖能够降低铅中毒大鼠体内的网织红细胞数目，并呈现量效关系。

表2 海带多糖对大鼠血中网织红细胞百分比的影响

注：与空白对照组比较，aP<0.05；与模型对照组比较，bP<0.05

2.3 海带多糖对大鼠血清中标志酶活性的影响

LDH：与空白对照组比较，模型对照组与海带多糖中、低剂量组LDH活性降低(P<0.05)；与模型对照组比较，阳性药物组和海带多糖高剂量组能纠正铅中毒引起的LDH活性降低(P<0.05)。

G-6-PD:与空白对照组比较，模型对照组与海带多糖高、低剂量组G-6-PD活性降低(P<0.05)；与模型对照组比较，阳性药物组和海带多糖高、中剂量组能使G-6-PD活性升高(P<0.05)。

ACP：与空白对照组比较，模型对照组、阳性药物组和海带多糖低剂量组ACP活性均降低(P<0.05)；与模型对照组比较，海带多糖高剂量组能改善ACP活性(P<0.05)，而且优于阳性药物组。

β-GD：各用药组与空白对照组和模型对照组比较，无统计学意义，说明铅中毒对β-GD活性影响不大(P>0.05)。

表3 海带多糖对大鼠血清中标志酶活性的影响

注：与空白对照组比较，aP<0.05；与模型对照组比较，bP<0.05

3 讨 论

本实验参照文献成功制备了铅中毒模型[6]。各组与模型对照组比较，阳性药物组和海带多糖高剂量组显示有统计学意义,说明海带多糖能降低铅中毒大鼠体内的血铅含量，并呈现量效关系。

网织红细胞属于幼稚红细胞，易被铅损害，铅中毒48小时后，血液中的网织红细胞数目升高；铅还可造成血红蛋白合成障碍，随着血铅浓度的升高，网织红细胞蛋白含量逐渐降低，而网织红细胞数目逐渐升高，单个网织红细胞的平均血红蛋白含量明显降低。本结果表明海带多糖能降低铅中毒大鼠体内网织红细胞数目。

LDH 、G-6-PD、 ACP、β-GD存在于血清中，与机体有着密切的关系，一旦受到影响，将会导致多种疾病的产生，铅中毒后会使LDH 、G-6-PD、 ACP活性降低。本结果表明海带多糖能改善铅中毒后LDH活性降低情况，升高G-6-PD和ACP活性，而经方差分析对β-GD活性影响不大。

本实验结果表明海带多糖对铅中毒大鼠有排铅作用，为开发海带多糖成为天然低毒的排铅药物提供进一步依据。

[1] Rokho K,Hu H,Rotnitzky A,et al.A longitudinal study of chronic lead exposure and physical growth in Boston children[J].EHP,1995,103:952-971.

[2] 张铣，刘毓谷.毒理学[M].北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1997.348-359.

[3] 张香莉，刘亚杰，杨雪萍等. 太安对大鼠血常规和肝功能的影响[J].中国工业医学杂志，2003,16(1):35-36.

[4] 周杰，陈安国.海藻多糖生物研究进展[J].饲料工业，2005，26(18)：12-15.

[5] 朱明.海藻糖的功能及其应用[J].食品工程，2003，(5):15.

[6] 牛延献，哈小琴. 不同程度铅中毒模型的制备[J].西北国际医学杂志，2009，30(1)：32-33.