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畜禽清瘟败毒散和泄痢康的体外抑菌研究

2009-09-18陈瑞利郁有祝屈凌波

关键词:肉汤药制剂纸片

陈瑞利 郁有祝 屈凌波

摘要:用清瘟败毒散和泄痢康,在对鸡沙门氏菌,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验中,均有较强的抑菌现象。冷浸法提取的中药只达到中敏,而煎煮法则可达高敏。

关键词:畜禽清瘟败毒散泻痢康体外抑菌

0 引言

随着畜禽业的发展,鸡沙门氏菌病、大肠杆菌病和金黄色葡萄球菌病被人们所重视[1-3]。在传统的抗菌药物治疗的过程中,由于长期单一使用某一类抗生素,使细菌产生不同程度的耐药性。为了能有效的克服这些缺点,并能调节动物机体的代谢,提高畜禽的生产性能。在临床应用过程中发现,河南农业大学兽药厂生产的中蕴药制剂“畜禽清瘟败毒散”和“泻痢康”,对畜禽传染性腹泻有显著疗效。为研究其作用机理,做了这两种中药制剂的体外抑菌试验,实验如下:

1 材料

1.1 菌株 鸡白痢沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均分离自病鸡,经形态特征、培养特性及系统生化和抗原鉴定,并经接种实验动物选出。证实为肯有该属种特性和较好病原性的菌株。

1.2 中药 畜禽清瘟败毒散(以下简称清败散)、泻痢康均由河南农业大学兽药厂生产。清败散主要有空心莲、川黄连、银花炭、板兰根、大青叶、淮山药、桔梗、赤芍、栀子、知母、丹皮、川芎、生石膏等多味中药材组成;泻痢康主要有川莲、空心莲、白头翁、赤芍、黄柏、葛根、党参、苍术、苡仁、山药、扁豆、云芩、泽泻、山楂、陈皮等多味中药材组成。

1.3 抗生素 氯霉素、庆大霉素、链霉素

1.4 培养基 普通培养基(营养琼脂27g,营养肉汤22g,蒸馏水100ml,混匀,煮沸,高压灭菌),普通肉汤管(营养肉汤22g,蒸馏水1000ml,混匀,煮沸,高压灭菌)

2 方法

2.1 中药的提取 对清败散和泻痢康散剂同时采用两种方法提取有效成份。

2.1.1 冷浸法 取清败散及泻痢康散各40g,分别投入烧杯中,加蒸馏水刚好浸过药面,在10-15℃以下浸渍48h,然后用四层干净的无菌沙布过滤,将滤液自然浓缩到40ml,使药液浓度为1g/ml,各以5ml药液稀释配成浓度为0.5g/ml待用。

2.1.2 煎煮法 取清败散及泻痢康散剂各40g,分别置烧杯中,加蒸馏水200ml,浸泡6h,然后加热煮沸,煎煮1.5h用四层干净的无菌沙布过滤,浓缩药液至40ml,使药液的浓度为1g/ml,各取5ml,稀释配成浓度为0.5g/ml的药液待用。

2.2 药敏纸片的制备 经过上述两种方法提取后共得到不同药物不同浓度的8种药液。先将新华I号滤纸用直径为6mm的打孔器打成小圆片,121℃高压蒸汽灭菌20min备用。然后将灭菌的纸片按每种药液10片,分别浸入8种不同的药液中,然后取出,放入灭菌的敞口小瓶中干燥、备用。

2.3 菌液的制备 将鸡沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别接种于营养琼脂干板上,置于37℃恒温培养箱中培养24h,让其长出菌落,挑选典型的单个菌落1-2个,用接种环吊取,在肉汤管的管壁上打碎后溶入肉汤中,置于37℃恒温培养箱中培养到肉汤较为混浊时,即成为试验所用的菌液。

2.4 体外抑菌试验 采用纸片法,用灭菌的接种环蘸取菌液,用表面划折线接种法均匀地将细菌接种于培养基上,贴上不同的药敏纸片。每种纸片分别编号标记,同样的培养皿做4个,置37℃恒温培养箱中24h后取出,测定并记录每种药敏纸片的平均抑菌环直径,作为药物相应浓度的抑菌环直径。共做三组,并分别测定每组的抑菌环直径。

3 结果

试验中各种药物不同浓度的抑菌环直径见表1-3。

4 讨论与分析

4.1 体外抑菌试验表明,清败散和泻痢康对三种病原菌均有较强的抑菌作用。煎煮法所提取的中药对三种病原菌均为高敏,而冷浸法只达到中敏的效果。

4.2 中药与西药的体外抑菌试验结果相比,二者的抑菌作用相差较大,但在治疗鸡白痢、仔猪黄白痢等疾病的临床实践中,这两种中药制剂的效果都很好,经分析其主要原因有以下两个方面:

4.2.1 试验中所用的提取方法有一定的局限性,没把中药中有效成份完全提取出来,从而影响到试验的结果,煎煮法比冷浸法效果好,如果用蒸馏法或别的方法,效果可能会更好一些,这还有待进一步通过试验验证。

4.2.2 中药防治疾病的作用机理与抗生素不同。抗生素进入机体后,直接与病菌作用,杀灭病菌;而中药进入机体后,从根本上调节机体细胞的代谢,提高细胞的活力,使机体的抗病能力增强,从而加强了机体对入侵的病原菌的抑菌杀灭作用,该两种中药的作用机理也是这样。当然,这只是作用机理的一个方面,详细过程还需进一步通过试验研究得出。

4.3 中药在治疗传染病方面,不易产生耐药性,也无化学药物残留问题。因此,可以认为这两种中药制剂在防治畜禽传染病方面具有良好的应用前景。

4.4 对清败散和泻痢康在治疗动物传染病方面的研究,为中药制剂在治疗动物及人类疾病方面提供了广阔的发展前景。

参考文献:

[1]甘肃农业大学主编.兽医微生物学[M].第二版.农业出版社.1994.202-224.

[2]韩文瑜等主编. 病原细菌检验技术[M].吉林科学技术出版社.1992.

[3]刘学良,刘素玲.几种中草药对部分禽病原体的体外抑菌试验[J].中国兽药杂志.1995(29)4:40-41.

郁有祝(1978-),男,讲师,硕士.

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