多肉类植物试管微型花卉研究初报
2009-05-17徐庆华范冬春
徐庆华 范冬春
摘要:以火龙果(Hvlocereus undatus)、玉翁(Cephalocereu sen…)和生石花(Lihops pseudotruncateIIa)三种植物的种子为材料,进行多肉类植物试管微型花卉培育的研究,最终确定试管微型花卉繁育的适宜培养基是MS,蔗糖3%,脱乙酰吉兰糖胶0.37%,pH值5.8~6.0,并且通过在培养基中添加红、蓝墨水调配出不同颜色的培养基,增加试管微型花卉的观赏性。
关键词:多肉类植物,试管微型花卉,植物组培
多肉类植物是一种外观别致、形态奇特、花色艳丽、刺密且尖的花卉,具有不畏干旱、不畏高温、不择环境,生命力极强的特点。试管花卉,也称天使花房,是通过植物组织培养技术,在人工控制的无菌环境下,生长在玻璃或透明塑料容器等相对密封的空间内的一系列迷你微型植物的总称。本试验开展多肉类植物试管微型花卉培育的研究,植物小苗生长在一个相对封闭的微小环境,方便携带运输,易于观赏,不需要特别的养护。这种微型花卉因其成本不高、见效快、可操作性强等优势可作为本科毕业生自主创业的新项目,制作成手机链、各种挂饰、摆设等,还可作为生物教育载体,便于学生深入了解植物组织培养及生长发育的规律。
材料与方法试验材料与试剂
试验材料选用火龙果(Hyloce reus undatus)、玉翁(Cephalocereu senilli)和生石花(Lithops pseudotruncatella)三种植物的种子。配置MS培养基相关试剂、蔗糖、脱乙酰吉兰糖胶(Gelrite)、升汞、吐温、酒精、红和蓝墨水、青霉素小药瓶等均购置于哈尔滨博大化学试剂公司。
种子灭菌
三种种子25℃蒸馏水浸泡24h后,超净工作台上,先用75%酒精溶液浸泡30s,用无菌水冲洗一遍:再用0.1%的升汞和吐温混合液浸10min,无菌水冲洗5次~6次。
种子萌发及培养基筛选
超净工作台上,灭菌的种子置于高压灭菌过的滤纸上吸干水分,最后将无菌种子接入含MS、1/2MS、1/4MS三种无菌培养基的锥形瓶(50 mL培养基/150mL锥形瓶)、每瓶10粒种子,在25±1℃、光照2000Lx、16h/d恒温光照培养并适时观察记录发芽及生长状况。以上培养基均含蔗糖3%、脱乙酰吉兰糖胶0.2%,pH值5.8~6.0,并用红蓝墨水调节培养基颜色。
无菌苗转微型试管及驯化培养
无菌条件下,将锥形瓶中培养一个月后的无菌小苗接入含MS培养基(含蔗糖3%、脱乙酰吉兰糖胶0.37%,pH值5.8~6.0)的微型试管(10mL培养基/20mL微型试管,5mL培养基/10mL微型试管),用红和蓝墨水调色,25±1℃、光照2000Lx、16h/d恒温光照培养三个月:之后转入室温下正常培养。培养过程中适时观察记录小苗生长状况。
结果与分析种子发芽率及培养基筛选
无菌种子接入MS、1/2MS、1/4MS三种无菌培养基中,每瓶20粒种子,每个种子接5瓶:种子在25±1℃、光照2000Lx、16h/d恒温光照培养。培养一周后,MS培养基中种子发芽率最高,发芽率统计结果见表1:MS中一月龄无菌苗生长状态最好,见图1、图2和图3。
无菌苗转微型试管培养
一月龄无菌小苗接入微型试管恒温光照培养三个月;转入室温下继续培养一个月。培养过程中小苗生长状况见图4。
结论
多肉类植物火龙果、玉翁、生石花的种子为材料,试管微型花卉繁育的适宜培养基是MS,蔗糖3%,脱乙酰吉兰糖胶0.2%,pH值5.8~6.0。成品保持每天至少6h的光照(普通灯光,日光管),无需其它管理,目前结果显示能正常生长五个月,无霉菌污染,是一种绿色观赏佳品。
培养基的固化剂选用透明度高、韧性强的脱乙酰吉兰糖胶(Gelrite),又名植物凝胶(Phytagel),用红、蓝墨水调配出色彩鲜艳的凝胶状透明营养基,培育的试管花卉既可观叶又可观根,增强了微型试管花卉的观赏价值。