威灵仙的研究进展

2009-05-13王云贺韩梅杨利民

吉林农业·下半月 2009年12期

王云贺韩梅杨利民

【摘要】对药用威灵仙的研究状况,包括品种资源、威灵仙药材及其类同品、易混品、伪品的鉴别研究及质量评价、化学成分、药理研究现状等方面的研究进行综述,并对药用威灵仙今后研究发展的方向作了展望。

【关键词】威灵仙品种资源研究质量评价化学成分药理作用

威灵仙(Clematis chinensis Osbeck),又称粉灵仙、灵仙、黑须公、铁灵仙等,为毛茛科植物威灵仙的根。威灵仙味辛咸,性温,有微毒,具有祛风湿,通络止痛之功效,主产江苏、安徽、浙江等地[1]。临床上主要用于治疗风湿痹痛,肢体麻木,筋脉挛急,屈伸不利等症状[2]。中药威灵仙的研究进展概述如下。

1.品种资源研究

自古以来威灵仙品种非常复杂。黄颖雅结合对有关文献的考证发现:全国有9个科23种商品的根以“威灵仙”之名入药。其中有威灵仙、东北铁线莲、棉团铁线莲、柱果铁线莲、山木通、铁线莲、毛蕊铁线莲、太行铁线莲、锥花铁线莲、单叶铁线莲、两广铁线莲、毛柱铁线莲、小木通、草珊瑚等[3]。然而,2005年版的《中国药典》[2]规定正品威灵仙的原植物为毛茛科铁线莲属威灵仙(Clematis chinensis Osbeck)、棉团铁线莲(Clematis hexapetala Pall.)、东北铁线莲(Clematis manshurica Rupr.)的根及根茎。

2.威灵仙药材及其类同品、易混品、伪品的鉴别研究及质量评价

长期以来,威灵仙药材原植物来源混乱,所以在药材鉴别,质量评价等方面的研究较多[4—9]。随着科学技术的提高,人们发明了更加简便、准确的方法。2002年程存归等人采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)法,借助OMNI采样器直接测定了中药材威灵仙及其伪品华东蒺藜、山木通和毛柱铁线莲的红外光谱,结果发现正伪品的红外光谱差别较大,所以认为FTIR法可以直接、快速、准确地对威灵仙药材及其伪品进行区别鉴定[10]。随着中药研究的发展,中药的质量研究逐渐从单一有效成分或指标性成分的定性、定量分析转向有效成分群体分析,并建立了相应的指纹图谱。2006年曾映旭[11]等人采用气相—质谱联用仪(GC—MS)对24个来源不同的威灵仙样品中的挥发油进行指纹图谱分析,并运用主成分分析法及K—均值聚类法对其进行化学模式识别研究。结果表明,所研究的24个威灵仙样品可分为两类,其中19个威灵仙药材样品化学成分相近,聚为一类;另外5个威灵仙药材化学成分与主体威灵仙药材成分间存在着一定差异,被聚为另一类,这为威灵仙的质量控制提供了理论依据。建立的主体威灵仙药材的指纹图谱化学模式可作为中药威灵仙的质量评价标准。2007年方洪壮等人运用递归渐进光谱投影法,探索中药材东北铁线莲与棉团铁线莲石油醚提取物的色谱指纹特征化学成分的异同。经比较发现,东北铁线莲和棉团铁线莲的色谱指纹特征中,至少分别有8种和6种单独的化学成分存在,两者共有的化学成分有14种,这一结果为威灵仙内在的质量评价和不同产地、不同品种样品之间的鉴别提供科学依据[12]。2009年谢乐[13]等人采用HPLC测定不同产地威灵仙中齐墩果酸的含量,为中药威灵仙的深入开发研究和质量控制提供了科学依据。

3.化学成分

2005年版中药大辞典记载威灵仙的根含白头翁素、白头翁内酯、甾醇糖类、皂苷类、内酯、酚类、氨基酸等化合物。叶含内酯、酚类、三萜、氨基酸和有机酸等物质。棉团铁线莲叶含香精类、山奈酚等黄酮类及生物碱、挥发油、树脂等,不含皂苷、鞣质或强心苷类。东北铁线莲的根含三萜皂苷:铁线莲苷A(Clematoside A)、铁线莲苷A′、铁线莲苷B、铁线莲苷C[2]。

3.1 三萜皂苷类化合物威灵仙的根中含有极其丰富的皂苷。He Ming等从水蒸气蒸馏提取后的药渣中分得一种新的皂苷clemaphenol A[14]。Mimaki Y从威灵仙根的甲醇提取液中分得8种皂苷,其中五种为新的齐墩果酸型三萜皂苷等[15]。Shao Bao—ping 等从威灵仙根的乙醇提取液中分得13种皂苷,其中得三种新的皂苷和一已知化合物[16,17]。

3.2 挥发性化合物何明等采用水蒸汽蒸馏法和超临界萃取技术,从威灵仙中各自提取到挥发性成分。从蒸馏提取物中鉴定出25种化合物,从超临界提取物中鉴定出21种化合物[18]。徐涛等[19]对峨眉山的威灵仙进行了分析,发现其挥发油含有50种化合物东北铁线莲果实的挥发油含有烷类、酸类、醇类、脂类、酮类化合物50种[20]。另有文献报道,从这种植物的花分离鉴定到七种化合物[21]。对威灵仙挥发油成分的分析、总皂苷分离纯化的方法及工艺条件方面的研究较多[18,20,22,23],目前最先进的方法是将GC—MS法与交互移动窗口因子分析法(AMWFA)结合,在二维数据和PTRI之上的化学统计学能为复杂威灵仙挥发油的分析提供一个快速的、精确的、互补的、方便的方法。

3.3 其他Shi She—po等[24,25]从东北铁线莲根及根茎中发现三种新酚苷化合物,和三种新的生物碱。Dong Cai—xia等[26]研究发现棉团铁线莲根及根茎中12种黄酮类化合物。

4.药理作用

4.1 抗炎镇痛和松弛平滑肌作用徐先祥等人研究发现,威灵仙总皂苷38、75、150mg/kg能明显延长小鼠热板痛阈时间,减少醋酸致小鼠扭体次数增多,减轻二甲苯致小鼠耳肿胀程度增大,威灵仙总皂苷25、50、100mg/kg对大鼠鸡蛋清诱导的足肿胀及棉球诱导的大鼠肉芽肿均有显著的抑制作用,说明威灵仙总皂苷具有显著抗炎、镇痛作用[27] 。威灵仙能够显著抑制纸片引起的大鼠肉芽组织生长,证明威灵仙具有抗炎镇痛和松弛平滑肌作用[28]。

4.2抗肿瘤作用威灵仙中的总皂苷具有较好的抗癌活性。邱光清等人研究总皂甙(CCS)对体外培养的艾氏腹水瘤、肉瘤S180腹水型和肝癌腹水型细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为242 g/ml,193g/ml和130g/ml。CCS 0.25 g/kg、0.5 g/kg和1 g/kg剂量对小鼠移植性肉瘤S180的瘤重抑制率分别为40.3%,55.1%和53.0%。但CCS (0.2 g/kg、0.4 g/kg和0.8 g/kg)对肉瘤小鼠S180A的生存期没有明显影响[29]。东北铁线莲的乙酸乙酯提取物具有一定的抗肿瘤活性,而且抑瘤作用具有一定的剂量依赖关系[30]。

4.3抗氧化作用威灵仙多糖具有清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的作用,降低H2O2 诱导的红细胞氧化溶血率,可显著提高肝损伤小鼠血清和肝脏中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力,降低丙二醛含量及肝脏指数,证明威灵仙多糖在体内外均具有显著的抗氧化作用,其抗氧化作用与清除氧自由基有关[31]。

4.4免疫抑制作用威灵仙总皂苷对DN2FB对小鼠迟发型过敏反应耳片肿胀程度有一定的抑制作用,表明了威灵仙总皂苷能够抑制细胞免疫功能。胸腺和脾脏是机体主要免疫器官。脾脏为次级淋巴器官,是成熟的免疫活性细胞。主要是B淋巴细胞定居的部位,同时也是淋巴细胞接受抗原刺激进一步分化增殖、发生免疫应答的部位,与体液免疫、细胞免疫均有密切关系。威灵仙总皂苷对胸腺和脾脏的抑制,从而证明了威灵仙总皂苷具有抑制机体特异性免疫功能的作用[32]。

4.5利胆作用有研究表明威灵仙水煎剂具有明显的预防胆结石的作用[33]。现代药理学研究认为,威灵仙可促进胆汁分泌,并能使奥狄括约肌松弛,起到利胆退黄的作用,故能取得疗效[34]。

4.6毒副作用威灵仙所含白头翁素与原白头翁素等挥发性成分为祛风湿止痹痛的主要成分,但其具有刺激性,临床过量服用或大剂量长时间外敷可引起中毒,使用时应从小剂量开始,可在处方中加甘草以调和药性,预防中毒[35]。王文英和李祥华研究了部分中药对肾脏的毒副作用,研究表明,铁脚威灵仙对肾脏具有毒副作用[36]。

5.问题与展望

从技术方面来看,目前DNA 分子标记技术和多方面分子生物学手段还未曾应用到威灵仙的研究当中,如在中药威灵仙的鉴定、分析威灵仙的道地性、中药质量标准化、药材种子种苗检测、研究药用成分的分布规律等诸多方面。

从研究方向来看,对威灵仙化学成分、药理作用及活性成分的提取、分离及机理研究较多,但对遗传基因、栽培和采收加工技术等方面的研究较少。如开展相应方面的研究,可为威灵仙药材规范化栽培,建立药材生产基地,加强生产管理等方面提供可靠的科学依据。

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