大庆地区ＲＨ阴性血人群普查报告
2009-05-06马振华关兴丽李晖
马振华 关兴丽 李 晖
Rh血型系统是仅次于ABO血型系统的第二大红细胞血型系统。对于一个地区血站来说，能有一个稳定的RH阴性献血队伍，及时提供临床所需的RH阴性血液尤为重要。自从2001年7月份开始，大庆市血站对所有公民义务献血者进行RhD抗原筛查，现将RhD抗原筛查情况总结分析如下。
1材料与方法
1.1 标本来源 2001年7月1日至2005年6月30日大庆公民义务献血样本共79 602份，年龄18~55岁，平均33.6岁。
1.2 检测试剂 抗D、抗-E、抗-C、抗-e、抗-c、抗人球蛋白（以上六种试剂均由美国DBL公司生产），5%Rh阳性红细胞（我站自制）。
1.3 主要设备一次性96孔U行微量板，德国贺利氏400R台式低温水平离心机，日本久保田KA-2200细胞洗涤离心机，普通光学显微镜，恒温水浴箱，7号注射头（将针头斜面磨成平头）。
1.4 检测方法 常规应用微量板法检测，微量板法检测RhD抗原阴性者进一步应用试管法确定。
1.4.1 微量板方法 向U型微量板底部每个孔内加抗D试剂3~5 ul，用竹签蘸取献血者的压积红细胞，混入微量板U 型孔内，每快板加待测血样93份，最后三孔作为对照孔。即阳性对照一孔（用抗D试剂加Rh阳性红细胞5 μl），细胞阴性对照一孔（用抗D试剂加5%Rh阴性细胞5 μl）血清阴性一孔（用AB型血清5 ul加5%Rh阳性红细胞5 ul）。用震荡仪温和振摇微量板，混匀，最后用水平离心机，1000 r/min离心1 min，判读、记录反应结果。1.4.2 试管法 微量板法的样本需用试管法反复测，试管法具体步骤：将每支试管标记后加抗Ｄ试剂一滴。然后加３％～５％待检红细胞悬液一滴，室温放置5 min。以1000 r/min离心15 s后观察结果。每批试验均要三管对照，即阳性对照一管。细胞阴性对照一管，血清阴性对照一管。
1.5 应用微量球蛋白试验方法和试管法检测均阴性标本，需进一步做抗人球蛋白试验以排除Du型。抗人球蛋白试验方法：向试管内加抗D血清3%~5%的受检者细胞各一滴，37℃水浴30 min用生理盐水洗涤3次，末次洗涤将上清倾干后，每管内各加抗人球蛋白试剂一滴，振摇悬浮后，离心看结果。如仍为阴性结果，即判定为受检者为RH阴性。Rh阴性样本确定后，需要确定后，需进一步鉴定E、e、C、c。
2 结果与讨论
检测的79602名无偿献血者，Rh抗原阳性79 418人，占99.77%。RhD抗原阴性184人，占0.23%。基本符合Rh阴性0.2%~0.5%的占有比例。但由于在此79 602名无偿献血者中，有很多献血者都是多次献血，致使Rh阴性血占比例相对较低，(即在0.2%~0.5%的下限)。详细结果见表1。
没有检出Du型。 对184例Rh阴性样本E.e.C.c抗原检测结果：ccdee有93人，ccdE有4人，CcdE有3人，Ccdee有57人，CdE有1人，Cdee有6人，ccdEc有17人，CcdEe有3人，可以看出：ccdee此抗原类型占有比例大约占50.5%[1]。
Rh阴性在ABO血型系统中的分布：在184例RH阴性无偿献血者中，A型43例占23.4%，B型为65例占35.3%，O型69人占32.6%，AB型16人占8.7%。与大庆地区群ABO抗原频率相比差异无统计学意义[2]。
自2002年7月1日至2005年6月30日，大庆地区共采集Rh阴性血124人次（其中大部分为一次性300~400 ml），约37.2 L，约占采血总量的0.18，低于Rh阴性血源所占的0.23%，可以说明大庆地区现有Rh血缘基本满足大庆地区Rh阴性用血的需要，各型供求比例平衡。
参 考 文 献
［1］ 赵桐茂.人类血型遗传学.北京科学出版社，1998:231-233.
［2］ 王来法.大庆地区ABO血型分布黑龙江省第二届输血专业学术交流汇汇编，1993:69.
