詹氏甲烷球菌ＤＮＡ连接酶在大肠杆菌中的表达纯化及连接活性鉴定

张　洋　谢响明　刘建华

摘要：对一种耐热性古茵——詹氏甲烷球茼(Methanocaldococetis jennaschii)的DNA连接酶进行了克隆、表达、纯化，并对其生物化学特性和酶学活性进行了初步研究．詹氏甲烷球菌DNA连接酶重组蛋白在ATP及Ma²⁺二价阳离子存在的条件下具有连接酶活性，能够封闭DNA链上的切割．通过不同温度下的测试，50～80℃为较适合连接温度，其耐热性强，甚至在90℃下加热5 min后仍有连接酶活性；其发挥活性的pH值范围比较宽泛，最适pH值为6.0～9.0．这是国际上对詹氏甲烷球菌DNA连接晦的首次报导。