发光杆菌碳端截短的Mcf毒素杀虫活性研究

谭思维　丁学知　夏立秋　吴　峰　孙运军　张友明

摘要：发光杆菌能产生很多毒素杀死昆虫宿主，这些毒素中有一种叫Mcf致软因子，可以在大肠杆菌中表达并毒杀毛虫，通过同源性比对分析，在Mcf氨基酸序列中N端有一个BH3的区域，拥有BH3结构域的蛋白具有细胞凋亡的功能，推测保留N端BH3结构域的碳端截短Mcf毒素具有杀虫毒力，从发光杆菌属(Photorhabdus luminescens subsp.laumondii)中克隆了杀虫毒素基因mcf的5端3960bp的核酸序列(包含BH3结构域)，将该基因连接到E.coli表达载体pET28a上，并转入BL21(DE3)，经IPl-G诱导后，在SDS-PAGE上发现145kD的目的蛋白条带，利用亲和层析纯化得到纯毒素，分别对甜菜夜蛾一龄幼虫喂食生测和对甜菜夜蛾四龄幼虫(Spodoptera ecigua)注射生测。显示该毒素具有喂食毒力和血腔毒力，证明含有BH3区域的碳端截短Mcf毒素有杀虫的生物活性。

关键词：发光杆菌；甜菜夜蛾；Mcf毒素；BH3结构域

中图分类号：Q939.96文献标识码：A文章编号：1007－7847(2009)04－0303－06